一，監(jiān)測(cè)依據(jù)
1，《中華人民(mín)共(gòng)和國國(guó)家標準(zhǔn)（醫藥工業(yè)潔淨室（區(qū)）沉(chén)降菌的(dí)測試方法(fǎ)）》GB/T 16294-2010
。
2，《藥品(pǐn)生(shēng)產(chǎn)質量管(guǎn)理規範》（2010年修訂）
。
二，檢測原(yuán)理(lǐ)
沉(chén)降菌的(dí)測試(shì)方法(fǎ)采用沉降(jiàng)法(fǎ)，即通(tōng)過自然沉降(jiàng)原理收集在空氣(qì)中的生物粒子(zǐ)於培(péi)養基(jī)平皿，經(jīng)若幹時間(jiān)，在適宜(yí)的條件(jiàn)下讓(ràng)其(qí)繁殖到可(kě)見的(dí)菌(jūn)落(là)進行計數，以平(píng)板(bǎn)培養皿(mǐn)中(zhōng)的菌落(là)數(shù)來判定潔淨(jìng)環境(jìng)內(nèi)的活微(wēi)生(shēng)物數(shù)，並(bìng)以此來(lái)評(píng)定潔淨室（區）的(dí)潔淨度(dù)
。
三，監測(cè)要(yào)求(qiú)
1，測試(shì)條件(jiàn)
（1）溫度和(hé)相對濕度：潔淨室(shì)（區）的(dí)溫度(dù)和(hé)相對濕(shī)度應與其(qí)生產及工(gōng)藝要求(qiú)相(xiāng)適應(yīng)（無(wú)特殊(shū)要求時(shí)，溫度(dù)在18～26℃，相對濕度在45%～65%為宜(yí)），同(tóng)時還(huán)應滿足測(cè)試(shì)儀(yí)器(qì)的使用(yòng)範圍(wéi)
。
（2）室(shì)內壓差，送(sòng)風量或風(fēng)速(sù)應符合要(yào)求
。
（3）高(gāo)效過(guò)濾(lǜ)器(qì)的泄(xiè)漏(lòu)測試(shì)應符合(hé)要(yào)求(qiú)
。
2，測(cè)試狀(zhuàng)態
（1）沉(chén)降(jiàng)菌(jūn)測試前，被測試潔淨室（區）的溫度(dù)，濕度(dù)須達(dá)到規(guī)定(dìng)的要求，靜(jìng)壓(yā)差(chà)必須(xū)控(kòng)製(zhì)在規定(dìng)值(zhí)內
。
（2）沉(chén)降菌測試前，被測試潔淨室(shì)（區）已(yǐ)經過(guò)消(xiāo)毒(dú)
。
（3）測試狀態(tài)有靜(jìng)態和(hé)動態兩種(zhǒng)，測試狀態(tài)的選(xuǎn)擇必(bì)須(xū)符(fú)合生產(chǎn)的(dí)要求(qiú)，並在報告中注明測試狀(zhuàng)態(tài)
。
3，測試(shì)時間
（1）靜態(tài)a：單(dān)向流(liú)潔淨(jìng)室（區(qū)）在空氣(qì)淨(jìng)化係(xì)統正常運行10min後開(kāi)始(shǐ)，非單(dān)向(xiàng)流(liú)潔淨(jìng)室（區(qū)）在空氣淨(jìng)化係統正常運(yùn)行30min後開始(shǐ)
。
（2）靜態b：單(dān)向流潔(jié)淨室（區）在(zài)生(shēng)產操作人員撤離現場自淨(jìng)10min後(hòu)開始；非單向流潔淨室（區）在生產(chǎn)操(cāo)作人員撤離(lí)現(xiàn)場(cháng)，自(zì)淨(jìng)20min後(hòu)開始
。
（3）在動(dòng)態(tài)測(cè)試(shì)時，則(zé)須(xū)記(jì)錄生(shēng)產(chǎn)開(kāi)始的(dí)時間以及(jí)測試時間
。
備(bèi)注：靜(jìng)態a指(zhǐ)潔淨室（區）在空氣(qì)淨(jìng)化係統已(yǐ)經安(ān)裝完(wán)畢且功能完備的情況下，生(shēng)產工(gōng)藝設備(bèi)已安裝，潔淨室（區）內(nèi)沒(méi)有(yǒu)生產人(rén)員的狀態
。
靜態(tài)b指潔淨(jìng)室（區(qū)）在(zài)生產(chǎn)操(cāo)作全部結(jié)束，生產操作(zuò)人員(yuán)撤(chè)離現(xiàn)場(cháng)並經過(guò)20min自淨後(hòu)的狀態(tài)
。
四，采樣(yàng)
1，最少采樣點數(shù)目的(dí)確定
根據潔淨(jìng)室（區(qū)）麵積大(dà)小和(hé)潔淨級(jí)別(bié)要求(qiú)不同確定最(zuì)少(shǎo)采(cǎi)樣點(diǎn)數(shù)目(mù)，按國(guó)家(jiā)標準要求，采(cǎi)樣在滿足最(zuì)少(shǎo)采樣點(diǎn)數的同(tóng)時還應滿(mǎn)足(zú)最少(shǎo)培養皿(mǐn)數
。不(bù)同級別的潔淨室(shì)（區）最少(shǎo)采樣點(diǎn)數(shù)可按下(xià)表確定：

備注：表(biǎo)中的麵積對於(yú)單(dān)向(xiàng)流潔淨室(shì)指(zhǐ)的(dí)是(shì)送(sòng)風麵(miàn)積，對於(yú)非單向流潔淨(jìng)室指的是(shì)房間(jiān)麵積
。
最少(shǎo)培養皿數(shù)按下(xià)表確定：

2，采樣(yàng)點的布置
（1）工作區(qū)測(cè)試(shì)點位置(zhì)離(lí)地(dì)0.8～1.5m
。
（2）可在(zài)關鍵設(shè)備或關鍵工作活動範(fàn)圍(wéi)處增加(jiā)測試點
。
（3）采(cǎi)樣(yàng)點(diǎn)的布置力求(qiú)均(jūn)匀，避免采(cǎi)樣點在某(mǒu)局部區域(yù)過於(yú)集中或(huò)稀(xī)疏(shū)
。
3，測試(shì)步(bù)驟(zhòu)
（1）測試(shì)前，用75%乙(yǐ)醇棉球或(huò)0.1%新潔(jié)爾(ěr)滅(miè)溶(róng)液擦拭培養皿(mǐn)外表麵後，將(jiāng)培養皿放(fàng)入(rù)傳(chuán)遞窗內殺菌(jūn)至(zhì)少30min
。
（2）將(jiāng)已製(zhì)備好的(dí)培養基(jī)平皿(mǐn)麵(miàn)朝上按采(cǎi)樣點布置圖由內(nèi)至(zhì)外逐個放(fàng)置，逐一打(dǎ)開皿(mǐn)蓋，把(bǎ)培養(yǎng)皿蓋(gài)朝下斜(xié)靠(kào)在培養皿(mǐn)邊(biān)緣，使培(péi)養皿表麵暴(bào)露在空氣(qì)中1h以(yǐ)上，但不大於(yú)4h，再講(jiǎng)培(péi)養(yǎng)皿(mǐn)蓋好後倒(dǎo)置
。
（3）靜態測試時，培(péi)養皿暴露(lòu)時(shí)間為(wéi)30min以(yǐ)上(shàng)；動(dòng)態測試時，單個(gè)沉降碟的(dí)暴露(lòu)時間可(kě)以(yǐ)少於4h，同一位(wèi)置(zhì)可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測(cè)，並積累計數(shù)，直至監(jiān)測時間(jiān)累(léi)計達到4h
。
采(cǎi)樣(yàng)注意事項：
（1）測(cè)試人員(yuán)必(bì)須穿戴符(fú)合環境(jìng)潔淨度級別(bié)的(dí)工(gōng)作(zuò)服
。
（2）靜(jìng)態測試(shì)時，室(shì)內(nèi)測試人(rén)員(yuán)不得多於2人(rén)
。
（3）對於單(dān)向流(liú)潔淨(jìng)室(shì)（區）或(huò)送(sòng)風(fēng)口(kǒu)，采(cǎi)樣器(qì)采(cǎi)樣(yàng)口(kǒu)朝向(xiàng)應正對氣(qì)流(liú)方向；對(duì)於非單向流(liú)潔(jié)淨室（區(qū)），采樣口(kǒu)向(xiàng)上(shàng)
。
（4）布(bù)置(zhì)采樣點時，至(zhì)少(shǎo)應盡量(liáng)避開塵粒較(jiào)集中的回(huí)風(fēng)口
。
（5）采樣(yàng)時(shí)，測試人員應(yīng)站在采樣(yàng)口的下風(fēng)側，並盡量少走動
。
（6）應(yīng)采(cǎi)取(qǔ)一(yī)切(qiē)措施防(fáng)止采樣(yàng)過(guò)程(chéng)的汙(wū)染和其(qí)它可(kě)能對樣(yàng)本(běn)的(dí)汙(wū)染
。
五(wǔ)，培(péi)養(yǎng)
（1）全(quán)部采樣結(jié)束後，將(jiāng)培(péi)養皿(mǐn)倒(dǎo)置(zhì)於(yú)恒(héng)溫(wēn)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，注(zhù)意觀(guān)察菌落(là)生(shēng)長(cháng)情況(kuàng)
。
（2）采用(yòng)大豆(dòu)酪(lào)蛋白瓊脂培養(yǎng)基(jī)配製的培養皿經采樣後(hòu)，在(zài)30～35℃培(péi)養(yǎng)箱中(zhōng)培養，時(shí)間不(bù)少(shǎo)於2天(tiān)；采(cǎi)用(yòng)沙氏(shì)培養基配製(zhì)的培(péi)養(yǎng)基經采(cǎi)樣後(hòu)，在20～25℃培(péi)養箱中(zhōng)培(péi)養，時(shí)間(jiān)不(bù)少(shǎo)於5天
。
（3）每批(pī)培(péi)養(yǎng)基(jī)應(yīng)有對(duì)照(zhào)試驗，檢驗培(péi)養基(jī)本身是否(fǒu)汙染
。可(kě)每(měi)批(pī)選定(dìng)3隻培養(yǎng)皿作(zuò)對(duì)照培(péi)養(yǎng)
。
六(liù)，菌落計數
（1）用肉眼對(duì)培(péi)養(yǎng)皿上所有(yǒu)的菌落直接(jiē)計(jì)數，標記或在菌(jūn)落(là)計數器上(shàng)點計(jì)，然後用5～10倍放(fàng)大(dà)鏡檢查(chá)有(yǒu)無(wú)遺(yí)漏(lòu)
。
（2）若培(péi)養皿上有2個(gè)或2個以上的菌落(là)重(zhòng)疊，可分辨(biàn)時仍以2個或(huò)2個以上菌(jūn)落計數(shù)，不(bù)能(néng)分辨時，以(yǐ)1個菌落計(jì)數
。
七，計(jì)算結(jié)果(guǒ)
用(yòng)計(jì)數方法得出(chū)各個培(péi)養皿(mǐn)的菌落數(shù)之(zhī)和，每個(gè)檢測(cè)點的(dí)沉降(jiàng)菌(jūn)平(píng)均(jūn)菌落數用(yòng)下(xià)式計算：

式(shì)中(zhōng)，為(wéi)平均菌(jūn)落數
    M1為(wéi)1號培(péi)養皿菌落(là)數
    M2為2號(hào)培(péi)養皿(mǐn)菌(jūn)落數
    Mn為n號(hào)培(péi)養皿菌(jūn)落(là)數
    n為(wéi)培養皿總數
八，結果(guǒ)與判(pàn)定(dìng)
每個(gè)測點(diǎn)的沉(chén)降菌平均菌落(là)數(shù)必須低(dī)於所選定(dìng)評定標準中(zhōng)的界(jiè)限(xiàn)
。在靜態(tài)測(cè)試(shì)時，若(ruò)某(mǒu)測(cè)點的(dí)沉(chén)降菌平均菌落數(shù)超過評定標準，則應重新采樣兩(liǎng)次(cì)，兩次(cì)測(cè)試(shì)結果(guǒ)均(jūn)合(hé)格(gé)才能(néng)判(pàn)為(wéi)符(fú)合
。不(bù)同級(jí)別潔(jié)淨室（區(qū)）沉降菌(jūn)技(jì)術指(zhǐ)標(biāo)見下表所(suǒ)示：

九，記(jì)錄(lù)
潔淨室(shì)（區）沉(chén)降菌(jūn)的(dí)監(jiān)測(cè)應填寫記(jì)錄(lù)，監(jiān)測報告應(yīng)包(bāo)含以下(xià)內(nèi)容：
（1）測試(shì)者(zhě)的名稱(chēng)和地(dì)址，測試(shì)日(rì)期
。
（2）測(cè)試(shì)依據(jù)
。
（3）被(bèi)測(cè)潔淨室(shì)（區）的平(píng)麵(miàn)布置
。
（4）有關測試(shì)儀器(qì)及其(qí)測試方(fāng)法的(dí)描(miáo)述
。
（5）測試結(jié)果(guǒ)，包(bāo)括所有統計計(jì)算資料
。