驗證(zhèng)通常是(shì)由(yóu)安裝(zhuāng)確(què)認(rèn)（IQ），運行(háng)確認(rèn)（OQ），性(xìng)能確認(rèn)（PQ）組(zǔ)成(chéng)的(dí)。其中(zhōng)儀器(qì)儀表(biǎo)的(dí)校(xiào)準可以歸屬(shǔ)於安(ān)裝確(què)認，也(yě)可(kě)以單獨成為(wéi)一(yī)個(gè)組成(chéng)部分，性(xìng)能確認(rèn)是做後(hòu)的判(pàn)斷。在生(shēng)產或工藝(yì)驗證中，性能確認(rèn)是檢(jiǎn)驗(yàn)該工藝過程的結(jié)果；在生產(chǎn)環(huán)境驗證中(zhōng)，性能(néng)確認(rèn)是對空氣淨(jìng)化係統(tǒng)是(shì)否能(néng)達(dá)到規定的潔(jié)淨(jìng)度(dù)做出判斷(duàn)，即合格還是不(bù)合(hé)格，因(yīn)此性(xìng)能確認也(yě)就是常規意義上或狹(xiá)義(yì)上的“驗(yàn)證”，也就(jiù)是(shì)說(shuō)，平時所做(zuò)的不包(bāo)括安(ān)裝(zhuāng)確(què)認及運(yùn)行(háng)確認(rèn)的驗證實(shí)際(jì)上就(jiù)是“性(xìng)能確認(rèn)”。在空氣淨(jìng)化係統(tǒng)驗證中(zhōng)，為了(liǎo)不(bù)引起誤解(jiě)，將(jiāng)性能(néng)確認(rèn)稱(chēng)為(wéi)“潔淨(jìng)度測定”。醫藥工業(yè)潔淨室的潔淨度包括(kuò)懸浮(fú)粒子和微生物兩(liǎng)個方麵，因此潔淨(jìng)度的測(cè)定(dìng)主要進行懸(xuán)浮(fú)粒(lì)子和微生(shēng)物(wù)的測定。
1，懸浮粒子(zǐ)測定(dìng)
懸(xuán)浮粒(lì)子的(dí)測定(dìng)可(kě)參見國家標準GB/T 16292--2010《醫藥工業(yè)潔淨室(shì)（區）懸(xuán)浮(fú)粒子的(dí)測試方(fāng)法(fǎ)》（以下(xià)簡(jiǎn)稱(chēng)《粒子(zǐ)測(cè)試方法》），要(yào)點歸(guī)納如(rú)下：
（1）懸(xuán)浮(fú)粒子的(dí)測定方法
主要有顯(xiǎn)微(wēi)鏡法(fǎ)及(jí)自(zì)動(dòng)粒子(zǐ)計(jì)數法。
①顯微鏡(jìng)法(fǎ)。顯(xiǎn)微鏡法是(shì)用抽(chōu)氣泵(bèng)抽取(qǔ)潔淨(jìng)室內的(dí)空(kōng)氣，把在測(cè)定用(yòng)的(dí)濾膜(mó)表(biǎo)麵上捕(bǔ)集到的(dí)粒徑中大於5um的(dí)粒(lì)子(zǐ)用顯微鏡計數的(dí)方法(fǎ)。用(yòng)顯微鏡(jìng)法(fǎ)測(cè)定的(dí)直徑(jìng)為(wéi)粒(lì)子(zǐ)的大(dà)直(zhí)徑。
②自動粒(lì)子(zǐ)計(jì)數法(fǎ)。自動粒(lì)子計(jì)數法(fǎ)是(shì)把(bǎ)潔淨(jìng)室(shì)中粒(lì)徑(jìng)大(dà)於(yú)0.5um的粒子，按(àn)懸浮(fú)狀(zhuàng)態連續計數的(dí)方(fāng)法(fǎ)。在(zài)自動(dòng)粒(lì)子計數法中(zhōng)規定(dìng)懸(xuán)浮(fú)粒子的粒(lì)徑等於標準粒子光散(sàn)射量的(dí)球(qiú)的(dí)相當直徑。自動粒(lì)子計數(shù)器(qì)為了保持其特性，需定期用聚苯乙烯(xī)膠(jiāo)乳(rǔ)進行脈(mài)衝(chōng)校準(zhǔn)及流量校(xiào)準。
（2）懸浮粒(lì)子(zǐ)潔淨度(dù)監測(cè)
懸浮(fú)粒子(zǐ)潔(jié)淨(jìng)度監測(cè)的采(cǎi)樣點數(shù)目及(jí)其布(bù)置應根據產品的生產及工藝關鍵(jiàn)操(cāo)作區設(shè)置。一般(bān)對於高效(xiào)過濾器裝(zhuāng)在(zài)末(mò)端(duān)的(dí)空(kōng)氣淨(jìng)化(huà)係統及(jí)層(céng)流(liú)罩(zhào)，隻(zhī)需在工作區(qū)（離(lí)地0.7～1m處）設置(zhì)測(cè)點(diǎn)即可；而高效(xiào)過濾器裝在(zài)空(kōng)調器內及末端為亞(yà)高效過濾器(qì)（效率≥95%）的空(kōng)氣(qì)淨化(huà)係統，除在(zài)工作區設(shè)置(zhì)測點外(wài)，還需(xū)在(zài)每(měi)個送(sòng)風口(kǒu)處（離開(kāi)風(fēng)口約(yuē)0.3m）設置一個測(cè)點。
懸浮粒(lì)子潔淨度(dù)測定的小(xiǎo)采樣量(liáng)和少采樣點數目(mù)參(cān)見《粒(lì)子(zǐ)測試方(fāng)法》的規定。
（3）懸浮粒子潔(jié)淨度(dù)級別的(dí)結果判定
結果(guǒ)評(píng)定(dìng)參見(jiàn)《粒子(zǐ)測試方(fāng)法(fǎ)》規定的兩個(gè)條件。需要說明的(dí)是，《粒子(zǐ)測試方(fāng)法》的標準未說明是日常(cháng)監(jiān)測還是驗證(zhèng)。一(yī)般來說，驗證要求應嚴一(yī)些，它(tā)是根(gēn)據(jù)動，靜比來(lái)確定合(hé)格標準的(dí)。測(cè)試狀態有(yǒu)靜(jìng)態(tài)和(hé)動態(tài)測試兩種(zhǒng)。
①靜態測試(shì)是(shì)在(zài)潔淨(jìng)室（或潔(jié)淨區）空氣淨(jìng)化(huà)係統(tǒng)已(yǐ)處(chǔ)於(yú)正常(cháng)運(yùn)行狀(zhuàng)態(tài)，工(gōng)藝設備(bèi)已(yǐ)安(ān)裝，在潔淨室(shì)（或潔淨區）內(nèi)沒有(yǒu)生產人員的情(qíng)況(kuàng)下(xià)進行測(cè)試。
②動態測(cè)試(shì)是在(zài)潔(jié)淨室（或(huò)潔淨(jìng)區）已處(chǔ)於正常(cháng)生產狀態下(xià)進(jìn)行測(cè)試。
2，微生物(wù)測(cè)定
微(wēi)生物(wù)測(cè)定(dìng)的(dí)目的是(shì)確(què)定浮遊(yóu)的(dí)生(shēng)物微粒濃(nóng)度(dù)和(hé)生(shēng)物微(wēi)粒沉降(jiàng)密度(dù)，以(yǐ)此(cǐ)來(lái)判(pàn)斷(duàn)潔(jié)淨(jìng)室是否(fǒu)達(dá)到(dào)規(guī)定的潔淨度(dù)。因(yīn)此微(wēi)生物(wù)測定有(yǒu)測定浮(fú)遊菌和(hé)測定(dìng)沉降菌兩種方法(fǎ)。
細菌通常肉(ròu)眼(yǎn)看不見，可將(jiāng)它(tā)們(mén)采(cǎi)集或(huò)沉(chén)降到培養(yǎng)基中(zhōng)培(péi)養(yǎng)。細菌培養(yǎng)時，由一個或幾(jī)個細菌繁殖(zhí)而成(chéng)的一細(xì)菌團(tuán)稱(chēng)為菌落形(xíng)成(chéng)單元數(shù)（CFU），也(yě)稱(chēng)菌落(là)數。浮遊菌用(yòng)計數(shù)濃度(dù)表(biǎo)示(shì)（CFU/L或(huò)CFU/m3），沉降(jiàng)菌用沉(chén)降濃(nóng)度(dù)表示［（CFU/（皿(mǐn).min）］。
浮(fú)遊(yóu)菌與沉(chén)降菌(jūn)的(dí)關(guān)係(xì)存在著以下(xià)近(jìn)似公(gōng)式：
Ng=NV_sFT
式(shì)中，Ng是在F麵積(jī)上的細菌沉降數(shù)，CFU
    N是(shì)在空(kōng)氣(qì)中的(dí)浮(fú)遊菌濃(nóng)度，CFU/cm³
    V_{s是(shì)含菌(jūn)粒(lì)子(zǐ)沉(chén)降(jiàng)速(sù)度，cm/s
    F是(shì)沉(chén)降麵積，}cm^{2
    T是沉降時間(jiān)，s
（1）浮遊(yóu)菌的(dí)測(cè)定(dìng)
浮(fú)遊菌的(dí)測(cè)定(dìng)可以參(cān)照(zhào)國家(jiā)標準GB/T 16293-2010}《醫藥工(gōng)業潔淨室（區）浮(fú)遊(yóu)菌的(dí)測試(shì)方(fāng)法(fǎ)》（以下簡稱(chēng)《浮遊菌測試方法(fǎ)》）。重(zhòng)點歸納(nà)如(rú)下：
①浮遊(yóu)菌測試(shì)是通過收集懸(xuán)浮在空氣中的生(shēng)物(wù)性微粒(lì)，通過專門(mén)的(dí)培(péi)養基，在適應的生(shēng)長(cháng)條件下，讓其(qí)繁(fán)殖(zhí)到(dào)可見的菌落進(jìn)行(háng)計數(shù)，從而(ér)判(pàn)定潔(jié)淨(jìng)環(huán)境中單(dān)位體積(jī)空氣(qì)中菌(jūn)落(là)數的(dí)多少。
②浮(fú)遊(yóu)菌(jūn)測定需有專(zhuān)門的采(cǎi)樣器，真空抽(chōu)氣泵等設備，浮遊菌采(cǎi)樣器(qì)常(cháng)用(yòng)撞擊法中的狹(xiá)縫式采樣(yàng)器。
③浮遊菌(jūn)采樣(yàng)器必須要(yào)有(yǒu)流(liú)量(liáng)計和(hé)定(dìng)時器，並嚴格按(àn)儀(yí)器說明(míng)書的(dí)要(yào)求定期進行校驗和(hé)操(cāo)作。
④浮(fú)遊菌測定的(dí)采(cǎi)樣(yàng)點及數目與(yǔ)懸浮(fú)粒子(zǐ)測(cè)定相同(tóng)，即在(zài)同懸粒子(zǐ)測(cè)定時(shí)相同(tóng)的測(cè)定(dìng)點采樣。
⑤浮(fú)遊菌潔淨度測定的小(xiǎo)采(cǎi)樣量和(hé)少采(cǎi)樣(yàng)點(diǎn)數目(mù)參見(jiàn)《浮遊菌測試方(fāng)法》的規定(dìng)。
⑥浮遊菌潔(jié)淨度的結果評定(dìng)參(cān)見《浮(fú)遊菌測試方法》的(dí)規定。
（2）沉(chén)降菌(jūn)的(dí)測(cè)定(dìng)
沉降菌是用暴露(lòu)法(fǎ)收集降落在(zài)培(péi)養皿(mǐn)中(zhōng)的(dí)生物性微(wēi)粒，加(jiā)以培(péi)養(yǎng)繁(fán)殖後計(jì)數得(dé)到的(dí)。沉(chén)降菌(jūn)的測(cè)定可參(cān)見(jiàn)國家標準(zhǔn)GB/T 16294-2010《醫藥工業潔淨室和(hé)潔淨(jìng)區中沉降菌(jūn)的(dí)測試方(fāng)法(fǎ)》（以(yǐ)下簡稱(chēng)《沉降菌測(cè)試方法》）。重點歸(guī)納如(rú)下：
①沉降(jiàng)菌(jūn)測定的設備(bèi)主要是90mm*150mm玻璃(lí)培(péi)養皿(mǐn)和各種(zhǒng)培(péi)養基。
②沉降(jiàng)菌測定的(dí)培養皿應(yīng)布置在(zài)有(yǒu)代表(biǎo)性的(dí)地方和氣流擾動小(xiǎo)的地方，其(qí)少采(cǎi)樣點數(shù)目(mù)見(jiàn)下表(biǎo)：

在(zài)滿(mǎn)足(zú)少測(cè)點數的同(tóng)時(shí)，還(huán)要(yào)滿(mǎn)足少培養皿(mǐn)數，如下(xià)表(biǎo)所示。不論(lùn)麵(miàn)積(jī)大小，作為(wéi)一(yī)個被測對象，都應該(gāi)滿足這個要求。

③采(cǎi)樣(yàng)方(fāng)法(fǎ)及(jí)培養(yǎng)。將(jiāng)培(péi)養皿按要求放置(zhì)後(hòu)，打開平(píng)皿蓋，使(shǐ)培養基表麵暴露(lòu)30min後(hòu)，將(jiāng)平皿蓋蓋上(shàng)，然(rán)後在(zài)30～35℃的(dí)條件下培養(yǎng)48h計數。
④結(jié)果(guǒ)計算：M=ΣM_i/n
式(shì)中(zhōng)，M為平均菌落(là)數，CFU
      M_{i為1,2,3，}…，n號平(píng)皿(mǐn)菌(jūn)落數
      n為(wéi)平(píng)皿總(zǒng)數
（3）物(wù)體(tǐ)表麵微生物測(cè)試(shì)
此(cǐ)測試(shì)的目(mù)的(dí)是確定物體表麵(miàn)微(wēi)生物(wù)汙(wū)染的程度(dù)。一般有棉(mián)簽(qiān)間接取樣後培養和直(zhí)接接(jiē)觸(chù)法取樣(yàng)兩(liǎng)種測(cè)試方法(fǎ)。
接觸法使用(yòng)羅達克培(péi)養皿(mǐn)，測(cè)試(shì)方(fāng)法是(shì)將培(péi)養(yǎng)皿直(zhí)接接觸(chù)需(xū)采(cǎi)樣(yàng)的物體(tǐ)表麵，培(péi)養(yǎng)後長出菌(jūn)落(là)。這(zhè)個測試(shì)技術適(shì)用於(yú)平整光滑的表麵。
這(zhè)項測試(shì)應在去汙(wū)染程序(xù)後(hòu)進(jìn)行(háng)。但瓊脂培(péi)養(yǎng)基(jī)留在物體(tǐ)表麵(miàn)上終究是個問題。因此(cǐ)，采樣(yàng)後應馬(mǎ)上(shàng)進(jìn)行(háng)去汙(wū)染。每隻(zhī)培養皿(mǐn)需(xū)做(zuò)好(hǎo)標誌，指明(míng)采樣點的確(què)切(qiē)位置(zhì)。應注意房間(jiān)裏的標(biāo)誌(zhì)供(gōng)現(xiàn)在(zài)和將(jiāng)來參考(kǎo)。