>

細胞室(shì)一般就(jiù)是負責單(dān)克隆抗體,HIV,體細胞等(děng)治(zhì)療(liáo)製(zhì)劑和(hé)診斷試劑(jì),生產用細(xì)胞(bāo)及(jí)牛血清(qīng)等檢驗(yàn)的(dí)實驗室;並(bìng)包括負責相應品種國(guó)家(jiā)藥(yào)品標(biāo)準(zhǔn),一類新藥和進口藥品(pǐn)標準的(dí)技(jì)術(shù)審(shěn)核,復核(hé),修訂(dìng)或起草等;負(fù)責相(xiāng)應品種國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質的(dí)研製,標定和(hé)分發(fā);開(kāi)展相應(yīng)技術(shù)方法研(yán)究(jiū)及技(jì)術(shù)人(rén)員培(péi)訓。
病理科(kē)細胞室主(zhǔ)要(yào)服務於(yú)臨床(chuáng),為(wéi)臨(lín)床醫生(shēng)提供及時(shí)而(ér)準(zhǔn)確的(dí)細胞學(xué)檢(jiǎn)查結(jié)果,它通(tōng)過(guò)無創或微(wēi)創的方(fāng)式(shì),既(jì)減輕病(bìng)人(rén)檢(jiǎn)查時的(dí)痛苦(kǔ)又可以獲(huò)得客(kè)觀(guān)的結果。
一,細胞室如(rú)何(hé)設置
1.無(wú)菌操作細胞室:
1)由更衣(yī)間(jiān),緩衝(chōng)間和操作間(jiān)三部分(fēn)組成。
2)更(gēng)衣(yī)間:位於培養室(shì)zui外(wài)部,用於更(gēng)換潔(jié)淨的衣(yī)帽(mào)鞋口(kǒu)罩。放置消毒(dú)的防護(hù)服,衣(yī)帽(mào)櫃(guì),鞋(xié)櫃。
3)緩衝(chōng)間(jiān):位於(yú)更衣(yī)間與(yǔ)操作間(jiān)之間,目的是為(wéi)了保證(zhèng)操作間的無(wú)菌環境(jìng)。放(fàng)置電冰箱(xiāng),液(yè)氮灌,消毒(dú)好(hǎo)的無菌(jūn)物(wù)品(pǐn)等。
4)操(cāo)作間:位(wèi)於內(nèi)部,於(yú)無菌(jūn)操作(zuò),細胞培(péi)養(yǎng)。放置淨(jìng)化工(gōng)作(zuò)台(tái)及(jí)二氧化碳(tàn)培養(yǎng)箱,離心機(jī),倒(dǎo)置顯微(wēi)鏡等(děng)。
房間要求:獨立房(fáng)間,按(àn)潔淨(jìng)廠房要求(qiú)建造(zào),並(bìng)需要(yào)保持(chí)空氣消(xiāo)毒和(hé)清潔(jié)無(wú)塵:
1)紫(zǐ)外綫(xiàn)燈—產生臭氧,並(bìng)且室內溫度(dù)及(jí)濕度均較高(gāo),不利(lì)於(yú)工(gōng)作人(rén)員健康。
2)空氣(qì)過濾的恒溫恒濕裝(zhuāng)置的空(kōng)氣潔淨(jìng)度級別(bié)如下(xià):

注:空氣潔淨(jìng)度級(jí)別(bié)表(biǎo):一般普(pǔ)通培養室(shì)常(cháng)選用(yòng)100000級的(dí)。
2. 準(zhǔn)備(bèi)室:常設(shè)置(zhì)在(zài)無(wú)菌操(cāo)作細胞室外(wài)部,主要(yào)進行培養(yǎng)液及有關培(péi)養用的液(yè)體等的(dí)製(zhì)備。主要設置(zhì):離(lí)心機(jī),水浴(yù)鍋,定時鐘(zhōng)表,普(pǔ)通天平及(jí)日常(cháng)分析處理物。
3. 洗刷(shuā)消(xiāo)毒(dú)間(jiān):要和其(qí)他(tā)區域分開,獨立一(yī)室,主要(yào)用(yòng)於(yú)各種(zhǒng)培(péi)養(yǎng)器(qì)皿的(dí)清洗(xǐ),準(zhǔn)備和(hé)消毒,常設(shè)置:烘(hōng)箱(xiāng),高壓蒸(zhēng)汽消毒鍋(guō),去離子水或(huò)者(zhě)蒸(zhēng)餾水(shuǐ)處(chǔ)理器(qì),酸(suān)缸,水槽刷子(zǐ)等(děng)。
二(èr),細胞(bāo)室常(cháng)用(yòng)的基(jī)本(běn)設備
1.儀器(qì):
1)超淨工作台(tái)-常(cháng)用側流(liú)式(shì)(垂直流)工作台,潔淨(jìng)度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。國(guó)內(nèi)產品(pǐn)一(yī)般(bān)都可以達標(biāo)。視場地大(dà)小選(xuǎn)用一個較寬(kuān)的(dí)或者(zhě)多個較小(xiǎo)的。
2)顯(xiǎn)微鏡(jìng):倒置熒(yíng)光(guāng)顯(xiǎn)微鏡(jìng),若(ruò)有(yǒu)條件,尚可(kě)配置帶(dài)有照相(xiāng)係統(tǒng)的高(gāo)質(zhì)量相(xiāng)差(chà)顯(xiǎn)微(wēi)鏡,解(jiě)剖(pōu)顯(xiǎn)微鏡,錄像(xiàng)係統或縮(suō)時電(diàn)影拍攝(shè)裝(zhuāng)置等,以(yǐ)便(biàn)隨(suí)時觀察(chá),記(jì)錄,攝(shè)影(yǐng)細胞生長情況(kuàng)。
3)CO2培養箱(xiāng):需(xū)國(guó)外產品(pǐn)。
4)幹燥箱:電(diàn)熱幹燥(zào)箱(xiāng)升(shēng)溫較高,一般(bān)需達(dá)到160℃以上(shàng)。國內產(chǎn)品可(kě)達標(biāo)。
5)水(shuǐ)純化裝(zhuāng)置(zhì):產生(shēng)去離子水(shuǐ),可用(yòng)三蒸(zhēng)水替代(dài)。
6)冰(bīng)箱:低溫(wēn)冰箱(xiāng)(-20℃)可(kě)選(xuǎn)國(guó)內(nèi)的,超(chāo)低(dī)溫冰箱(-70,80C,)需要國(guó)外產品。
7)液氮罐(guàn):國內(nèi)產(chǎn)品可(kě)。
8)離心(xīn)機:國內(nèi)產品可,低速(sù)離心機即(jí)可,不(bù)需要(yào)低溫冷凍(dòng)。用於細胞沉(chén)降,高速不好(hǎo)。
9)精密(mì)電子(zǐ)天平:國(guó)產即(jí)可,需達到(dào)精(jīng)密(mì)度:分析(xī)天(tiān)平(píng)的(dí)感量(liáng)為0.1mg,0.01mg和0.001mg。
10)消毒器:高(gāo)壓(yā)蒸汽消(xiāo)毒鍋,國產。
11)濾器(qì):用(yòng)於過濾(lǜ)培(péi)養(yǎng)基,國產進口都可。
2.常(cháng)用的培養器皿:
1)培(péi)養瓶(píng):由玻璃或塑料製成(chéng)。主要用(yòng)於培(péi)養,繁(fán)殖細胞(bāo)。進行(háng)培養時(shí)培(péi)養(yǎng)瓶瓶口(kǒu)加(jiā)蓋螺(luó)旋瓶蓋或(huò)膠塞,膠(jiāo)塞(sāi)多用於密(mì)封培(péi)養(yǎng)。國產(chǎn)培(péi)養瓶的規(guī)格(gé)以容(róng)量(liáng)(ml)表示(shì),如250ml,100ml,25ml等(děng);進口培養(yǎng)瓶(píng)則(zé)多以底麵(miàn)積(cm2)表示。
2)培(péi)養皿:由(yóu)玻璃或塑(sù)料(liào)製(zhì)成,供盛取,分離,處(chǔ)理(lǐ)組(zǔ)織(zhī)或做(zuò)細胞(bāo)毒(dú)性(xìng),集落形(xíng)成(chéng),單(dān)細胞分離(lí),同位(wèi)素摻入,細(xì)胞繁殖等實(shí)驗使用。常(cháng)用的(dí)培養(yǎng)皿規格(gé)有10cm,9cm,6cm,3.5cm等。
3)多孔(kǒng)培(péi)養(yǎng)板:為塑料(liào)製品(pǐn)。可供細(xì)胞克(kè)隆(lóng)及細胞(bāo)毒性等各種(zhǒng)檢(jiǎn)測(cè)實(shí)驗使用(yòng)。其優點(diǎn)是節(jié)約(yuē)樣本(běn)及(jí)試劑,可同時測(cè)試大量樣(yàng)本,易於(yú)進行無菌(jūn)操作。培(péi)養板(bǎn)分(fēn)為(wéi)各種規(guī)格(gé),常用(yòng)的規格有:96孔,24孔,12孔,6孔(kǒng),4孔(kǒng)等(děng)。
4)培(péi)養操作有(yǒu)關的(dí)器(qì)皿(mǐn):
a)貯液瓶(píng):主要(yào)用於存放(fàng)或配製(zhì)各種培(péi)養(yǎng)用液體(tǐ)如培養液(yè),血清(qīng)及試劑等。貯(zhù)液(yè)瓶(píng)分(fēn)為(wéi)各種不同規格(gé),如1000ml,500ml,250ml,100ml,50ml,5ml等。
b)吸管(guǎn):主(zhǔ)要(yào)分為刻度(dù)吸(xī)管(guǎn),無刻度吸(xī)管。刻(kè)度吸(xī)管(guǎn)主要用(yòng)於(yú)吸(xī)取,轉移液體,常用的(dí)有(yǒu)1ml,2ml,5ml,10ml等規格。無刻度吸管(guǎn)分為直(zhí)頭吸(xī)管及彎頭吸(xī)管(guǎn),除可(kě)以(yǐ)作吸取,轉(zhuǎn)移(yí)液體(tǐ)外(wài),彎(wān)頭尖吸(xī)管還(huán)常(cháng)用於吹打(dǎ),混匀及傳代(dài)細胞。
c)加樣(yàng)器(qì)(移(yí)液器(qì)):用於(yú)吸(xī)取(qǔ),移(yí)動液體(tǐ)或(huò)滴(dī)加(jiā)樣本。可根(gēn)據需要調節量(liáng)的(dí)大小,吸(xī)量(liáng)準確,方(fāng)便(biàn)。尤(yóu)以(yǐ)微量(liáng)加樣器(qì),可(kě)保(bǎo)證實(shí)驗樣(yàng)品(或試(shì)劑)含量,重復性(xìng)良(liáng)好。目前,可高(gāo)溫消毒的,多(duō)通道的各類移液器可供使(shǐ)用(yòng)者選(xuǎn)擇,能(néng)確(què)保(bǎo)加樣(yàng)準確,快(kuài)速,方便並(bìng)且達到(dào)無菌要求。
d)其他(tā)用品(pǐn):尚(shàng)有(yǒu)收(shōu)集細胞用(yòng)的離心管,放置(zhì)試(shì)劑或臨(lín)時插(chā)置吸管(guǎn)用(yòng)的(dí)試管,裝放(fàng)吸管以便(biàn)消毒的玻璃(lí)或(huò)不鏽鋼容器,用(yòng)於存放(fàng)小件培養(yǎng)物品便(biàn)於高壓消毒的(dí)鋁製(zhì)飯盒或貯槽,套(tào)於吸管頂部(bù)的橡膠吸頭(tóu),封(fēng)閉(bì)各(gè)種瓶,管的膠(jiāo)塞,蓋子(zǐ),凍(dòng)存(cún)細(xì)胞(bāo)用的(dí)安瓿(bù)或凍(dòng)存管(guǎn),不同規(guī)格的注射(shè)器,燒杯和(hé)量筒以及(jí)漏鬥,超淨工(gōng)作台使用的酒精(jīng)燈,供實(shí)驗人員操(cāo)作(zuò)前(qián)清(qīng)潔(jié)消毒(dú)手(shǒu)使用(yòng)的盛(shèng)有(yǒu)酒精(jīng)或(huò)其(qí)他(tā)消(xiāo)毒(dú)液的微(wēi)型(xíng)噴壺等。
三,細(xì)胞(bāo)室管理(lǐ)規章製度(dù)
細(xì)胞室是(shì)進(jìn)行各種細(xì)胞(bāo)培養的淨(jìng)化級(jí)實驗室(shì),所(suǒ)有(yǒu)進(jìn)入實驗室(shì)的人(rén)員(yuán)都必(bì)須遵守(shǒu)實驗室(shì)有關的規章製度(dù),接受實(shí)驗(yàn)室(shì)管(guǎn)理人員的管理。
*章 總(zǒng)則(zé)
*條(tiáo)細胞室(shì)主要由團隊內相(xiāng)關科(kē)研人員使用(yòng),原則(zé)上(shàng)不對(duì)外(wài)開(kāi)放,其(qí)他(tā)人(rén)員如確實(shí)需使用(yòng)細胞室(shì)必(bì)須(xū)預先征得實驗室負責人和細胞室負(fù)責人同(tóng)意。
第二(èr)條進出細胞(bāo)室實(shí)驗(yàn)需要嚴(yán)格登記。如(rú)有不(bù)符(fú)合實(shí)驗室(shì)工(gōng)作(zuò)和生(shēng)物安(ān)全(quán)要求(qiú)的(dí),實驗室負責(zé)人(rén)和細(xì)胞室工作人(rén)員(yuán)有(yǒu)權(quán)責令整(zhěng)改。
第三條(tiáo)使用(yòng)人員(yuán)需參(cān)加專門(mén)的細胞室使用規(guī)範(fàn)培訓(xùn)並通(tōng)過考核(hé)後,方(fāng)可獲準(zhǔn)進入細胞(bāo)室(shì)進行實驗。嚴(yán)禁未經(jīng)許可(kě)擅自進入細(xì)胞(bāo)室或使用相關(guān)設備。
第四條(tiáo)細胞(bāo)室(shì)正常使用(yòng)過程(chéng)中(zhōng),人員進出應(yīng)通(tōng)過(guò)緩(huǎn)衝間和(hé)風淋(lín)間(jiān);進出實驗(yàn)室的器械和樣品需(xū)通過(guò)傳(chuán)遞窗,嚴(yán)禁(jīn)隨身帶入(rù)。實驗(yàn)用品應盡量一次(cì)帶入,嚴(yán)禁將與實(shí)驗無關(guān)的(dí)物(wù)品(pǐn)帶(dài)入(rù)實(shí)驗(yàn)室,在細胞(bāo)室(shì)內不(bù)得進行(háng)微生(shēng)物等其(qí)它易(yì)汙(wū)染(rǎn)物的(dí)培養,禁止從(cóng)事任何(hé)高危生化實驗。
第五條實驗(yàn)人員應(yīng)愛(ài)護(hù)實(shí)驗室各類(lèi)儀(yí)器(qì),按(àn)照規則使(shǐ)用並(bìng)保(bǎo)持(chí)設備清(qīng)潔。實(shí)驗中的(dí)昂貴設(shè)備,未(wèi)經許可不得擅(shàn)自開關(guān)。精密儀器(qì)需經專門培(péi)訓後(hòu)方(fāng)能操(cāo)作未經許(xǔ)可(kě)不得(dé)改變設(shè)備儀器的(dí)預設參數。設(shè)備(bèi)儀(yí)器(qì)出現(xiàn)故障(zhàng)或發生(shēng)事故,應及時向實(shí)驗室負責(zé)人報告,安排(pái)專(zhuān)業人(rén)員進行(háng)檢(jiǎn)修。
第二(èr)章 條例(lì)
*條 常(cháng)規操(cāo)作
1.穿(chuān)著實驗服(fú)。實(shí)驗人員必須在細胞室(shì)緩(huǎn)衝間(jiān)內(nèi)更(gēng)換細(xì)胞(bāo)室實驗(yàn)服,嚴禁不穿實(shí)驗(yàn)服(fú)或直(zhí)接穿著普通實驗(yàn)室實驗服進(jìn)入細胞室(shì)。
2.穿著拖(tuō)鞋(xié)。在準備(bèi)間(jiān)換(huàn)下(xià)自己(jǐ)的鞋(xié)子,盡量(liáng)避免在緩衝(chōng)間(jiān)走動(dòng),停留。
3.細(xì)胞室(shì)zui多可6個(gè)人同(tóng)時(shí)使(shǐ)用。
4. 實驗(yàn)過(guò)程中(zhōng)嚴禁喧嘩(huá),閒聊(liáo),反(fǎn)復進(jìn)出細(xì)胞室。
第(dì)二條(tiáo) 培養箱使用規則
1. 從培養箱(xiāng)取放物(wù)品(pǐn)前(qián),用(yòng)酒精清(qīng)潔雙(shuāng)手(shǒu)(或手(shǒu)套(tào)),盡量縮短開(kāi)門時間和(hé)減少(shǎo)開(kāi)門次數。
注: 培(péi)養箱中的空氣(qì)是經(jīng)過過濾的(dí)潔(jié)淨(jìng)空(kōng)氣(qì)。長(cháng)時(shí)間(jiān)敞開(kāi)或頻(pín)繁(fán)開關培(péi)養箱,容易造(zào)成(chéng)汙(wū)染。
2.從(cóng)培養(yǎng)箱拿取細胞時輕拿輕(qīng)放,動(dòng)作迅速,隨(suí)手關緊(jǐn)培(péi)養箱門(mén)。未(wèi)經允許(xǔ),禁(jīn)止翻看,移動(dòng)他人(rén)細胞或(huò)樣(yàng)品,如(rú)有(yǒu)特(tè)殊需(xū)要的,請實驗室(shì)負責(zé)人協(xié)調。
3. 培(péi)養瓶(píng)皿放入(rù)培養(yǎng)箱(xiāng)前(qián),用酒精消(xiāo)毒(dú)表(biǎo)麵(miàn),並稍(shāo)等(děng)至酒精揮(huī)發後再(zài)放入(rù),以免(miǎn)培養箱(xiāng)內(nèi)滯留過(guò)多(duō)乙醇(chún)蒸氣。
4. 培(péi)養(yǎng)箱內細(xì)胞培(péi)養的放置(zhì)需(xū)整潔(jié)有序,方(fāng)便查找(zhǎo),同(tóng)時(shí)應(yīng)盡(jìn)量(liáng)提(tí)高(gāo)培養(yǎng)箱的使(shǐ)用效率,負責老師(shī)可視(shì)實(shí)驗(yàn)情況啟用或停(tíng)止空培養(yǎng)箱(xiāng)的使用(yòng),節(jié)約(yuē)資源(yuán)。
5. 普通培(péi)養中(zhōng)的細(xì)胞,若非(fēi)實驗特殊需要,每瓶(píng)/板細胞每天隻(zhī)需(xū)要觀察(chá)生(shēng)長(cháng)狀態一(yī)次,2人(rén)以上(shàng)共(gòng)用(yòng)的細(xì)胞(bāo),可約好(hǎo)時間(jiān)一起觀(guān)察。
注(zhù):頻繁將(jiāng)細胞拿(ná)出觀察,容易(yì)給培養箱(xiāng)造成汙染(rǎn),同時(shí)也會影(yǐng)響細(xì)胞生(shēng)長條件的恒(héng)定(dìng)。
6.原代細(xì)胞需放置(zhì)在(zài)原(yuán)代培養培(péi)養(yǎng)箱培(péi)養,不得放(fàng)置於(yú)其(qí)他培養(yǎng)箱,如一段(duàn)時(shí)間內無原代細胞(bāo)實(shí)驗(yàn),負責(zé)人可(kě)協(xié)調(tiáo)安(ān)排培養箱(xiāng)供(gōng)其他(tā)細胞(bāo)培(péi)養使用。
7.實驗人員應經常(cháng)注(zhù)意檢(jiǎn)查培養(yǎng)箱溫度(dù),CO2氣(qì)體量(liáng)是否(fǒu)相符(fú)設(shè)定值(zhí)。密切注(zhù)意(yì)培(péi)養箱(xiāng)內(nèi)的增濕(shī)盤(pán),定期更換無菌水(shuǐ)並進行(háng)消毒。密切注意(yì)培(péi)養箱內(nèi)情況,如出(chū)現(xiàn)黴變,菌(jūn)斑,支原(yuán)體(tǐ)和(hé)衣原體感(gǎn)染(rǎn)或其他明(míng)顯(xiǎn)染菌跡象,應(yīng)立(lì)即通(tōng)知管理員(yuán)及其(qí)它使用(yòng)者(zhě)。
第(dì)三(sān)條(tiáo) 顯微鏡使(shǐ)用規(guī)則(zé)
1.倒置相(xiāng)差(chà)顯微鏡(jìng)使(shǐ)用前,用酒(jiǔ)精棉從(cóng)中間至周圍擦(cā)拭(shì)載(zǎi)物(wù)台。
2.離(lí)開細(xì)胞(bāo)室時或較長時間(jiān)不需(xū)使(shǐ)用(yòng)時,及時關上電(diàn)源(yuán),延(yán)長燈泡壽(shòu)命。盡(jìn)量避免頻(pín)繁開關顯微鏡(jìng)電源(yuán)。
3.一次細胞實驗(yàn)使用完(wán)畢後,在顯(xiǎn)微鏡(jìng)使用記(jì)錄本上登(dēng)記。
4.熒(yíng)光(guāng)顯微(wēi)鏡(jìng)屬(shǔ)於貴重儀(yí)器(qì)需遵(zūn)循貴重(zhòng)儀器預(yù)約(yuē)使用規(guī)程。
第四(sì)條 超淨(jìng)台(tái)相關操作(zuò)規(guī)則(zé)
1.超(chāo)淨台使用(yòng)遵(zūn)循(xún)預約(yuē)原(yuán)則。在(zài)細胞(bāo)室入口處預約(yuē),細胞室內填寫(xiě)使用登記。
a:無預(yù)約者若有必(bì)要(yào)在(zài)他人預約時段內(nèi)使用(yòng),需先征(zhēng)得預(yù)約者(zhě)的同意(yì),否則應(yīng)無(wú)條件讓(ràng)出工作台,以(yǐ)免耽(dān)誤(wù)他人實驗。
b:使用(yòng)記(jì)號筆在預(yù)約表格上(shàng)提前預約下一(yī)周的使(shǐ)用時間(jiān),請注意周六(liù)周日是(shì)指(zhǐ)上周的周(zhōu)末。
c:預(yù)約(yuē)內容請包(bāo)括:時(shí)間範(fàn)圍(wéi),姓(xìng)名,如(rú)特殊(shū)實驗請寫(xiě)明。
2.超(chāo)淨(jìng)台(tái)使用前用(yòng)紫外(wài)燈照(zhào)射15分鐘(zhōng)滅(miè)菌,使(shǐ)用(yòng)前,後(hòu)需用酒精(jīng)棉球(qiú)擦拭工作區消(xiāo)毒,所(suǒ)有物(wù)品放入超(chāo)淨台內使用前均應(yīng)消(xiāo)毒(dú),超淨(jìng)台(tái)內(nèi)嚴(yán)禁堆(duī)放(fàng)過多物(wù)品(pǐn)影響(xiǎng)風(fēng)路(lù)平衡(héng),不同超(chāo)淨台內物品嚴禁頻繁(fán)交換使(shǐ)用(yòng)。
3.點(diǎn)燃酒精燈前需檢查(chá)瓶(píng)中酒精是(shì)否足(zú)夠,液麵應占瓶(píng)高1/3-2/3。
注(zhù): 消毒(dú)用75%的(dí)酒精(jīng),酒精燈(dēng)用95%以上的酒精(jīng),向噴(pēn)壺(hú)或燈內添(tiān)加(jiā)酒精時(shí)請留意。
4.超(chāo)淨台中應(yīng)擺放廢液杯(bēi),用於(yú)暫(zàn)時(shí)存放廢棄物(wù),實驗(yàn)結束後將(jiāng)杯內(nèi)加(jiā)入NaOH溶液(yè)處理(lǐ)片刻,廢液垃(lā)圾倒(dǎo)入(rù)水(shuǐ)池並同時用(yòng)水(shuǐ)衝釋(shì),固(gù)體(tǐ)垃(lā)圾倒(dǎo)入(rù)生(shēng)物樣品垃圾(jī)桶中。
注(zhù): 廢(fèi)液缸應(yīng)及(jí)時(shí)處(chǔ)理,嚴禁(jīn)長時(shí)間(jiān)放置,以免(miǎn)留有大(dà)量(liáng)培(péi)養(yǎng)液滋(zī)生(shēng)細菌(jūn)。
5.細胞(bāo)實驗後任何含有(yǒu)細(xì)胞(bāo)培(péi)養汙(wū)物的(dí)培養瓶(píng),離心管(guǎn),移液管(guǎn)等(děng)必須及時帶出細(xì)胞房。
第(dì)五條(tiáo) 器(qì)具(jù)的(dí)清洗(xǐ)規(guī)則
1.可(kě)回收的(dí)移(yí)液管(guǎn),離心管,培養瓶皿(mǐn)等(děng),放(fàng)入裝有清水的塑(sù)料(liào)桶中(zhōng)浸泡(pào),桶內(nèi)需有足(zú)量的(dí)清(qīng)水以(yǐ)沒過浸(jìn)泡物(wù)品。
注: 可(kě)回收器皿(mǐn)必(bì)要時先初步(bù)涮洗(xǐ)後再(zài)放入桶內(nèi),尤(yóu)其是(shì)培養(yǎng)瓶(píng)或血清管中(zhōng)有大(dà)量(liáng)高營養的(dí)液體殘(cán)留時,容易(yì)使桶(tǒng)內的清水長菌。保證(zhèng)浸(jìn)泡的瓶(píng),管內(nèi)*被清水充滿,而(ér)不是(shì)在裝有大(dà)量空氣(qì)的情況下被(bèi)壓倒桶底。
2.清(qīng)水(shuǐ)衝(chōng)洗(xǐ)後(hòu)及(jí)時(shí)放入(rù)酸缸浸泡,應(yīng)由使(shǐ)用者(zhě)本(běn)人(rén)及時清(qīng)洗(xǐ)晾幹(gān)備(bèi)用(yòng),操(cāo)作時(shí)請注(zhù)意(yì)帶橡(xiàng)膠(jiāo)手套(tào),小心操作(zuò)。
注(zhù): 禁(jīn)止長時間(jiān)浸(jìn)泡於(yú)清(qīng)水(shuǐ)中,此(cǐ)時(shí)細菌(jūn)可能已在桶(tǒng)中生長並(bìng)釋放內毒素。細菌內(nèi)毒素很(hěn)難(nán)通過常(cháng)規濕熱滅菌步驟去除幹淨(jìng),即(jí)使幹烤也不能保證其*失(shī)活(huó)。內(nèi)毒(dú)素對(duì)細(xì)胞(bāo)生長及(jí)多(duō)種(zhǒng)實驗均有較大(dà)影響。
洗(xǐ)滌程(chéng)序:清水(shuǐ)衝十次以(yǐ)上去(qù)除(chú)重(zhòng)金屬殘(cán)留,然後衝去離子水(shuǐ)5次,再用(yòng)超(chāo)純水(shuǐ)5次,倒置(zhì)於烘(hōng)箱中晾幹。並(bìng)及時(shí)包(bāo)紮滅菌。
第六(liù)條(tiáo) 冰(bīng)箱,試劑等相關(guān)操(cāo)作規(guī)則(zé)
1.從(cóng)冰箱取放(fàng)物(wù)品動作(zuò)要(yào)迅速,關門時(shí)要(yào)檢查門是否(fǒu)關好。按(àn)類別存放試劑。嚴(yán)禁長時間(jiān)敞開冰箱門(mén)。
2.各人(rén)存放於冰(bīng)箱內(nèi)的(dí)培養液,生(shēng)化(huà)試劑,樣品要(yào)注明姓名(míng),配製(zhì)日期(qī),樣(yàng)品名(míng)稱,特殊(shū)試劑需獲得(dé)細胞(bāo)室(shì)管理(lǐ)人員同(tóng)意(yì)後方能(néng)放置。不(bù)得(dé)使用他人的培(péi)養(yǎng)液或(huò)其他(tā)生(shēng)化試劑(jì)。
3.分裝(zhuāng)好(hǎo)的血清(qīng)長時間保存(cún)於(yú)-80℃,使用前放於4℃預解凍。原則上解凍好(hǎo)的(dí)血(xiě)清應全部(bù)配成(chéng)含血清(qīng)的培養基(jī)備(bèi)用(yòng),若有剩餘,則(zé)暫存(cún)於4℃並盡快使(shǐ)用。盡(jìn)量(liáng)不(bù)要(yào)使用(yòng)他人開(kāi)過(guò)的(dí)血(xiě)清,以(yǐ)免交叉汙(wū)染。
4.細(xì)胞室(shì)內的冰箱空間有(yǒu)限,盡(jìn)量(liáng)僅放置使用(yòng)頻率較(jiào)高(gāo)的(dí)試劑。請勿將一些閒(xián)置試(shì)劑(jì),汙染(rǎn)試(shì)劑(jì)長(cháng)期放置(zhì)在(zài)細(xì)胞(bāo)室。
5.工作(zuò)人(rén)員會(huì)定期對冰箱(xiāng)進行清理(lǐ),發(fā)現無標記,過期試(shì)劑(jì)等違規物品(pǐn)將全部(bù)清除出去,並且查(chá)找(zhǎo)試劑配置(zhì)人給予警告(gào)。
第七條 進入細胞(bāo)室(shì)物(wù)品(pǐn)控製(zhì)
1.所(suǒ)有(yǒu)進入細(xì)胞室的物品(pǐn)需(xū)經過傳(chuán)遞(dì)窗(chuāng),盡量(liáng)經過紫外(wài)照(zhào)射(shè),酒(jiǔ)精(jīng)表麵(miàn)消(xiāo)毒。
2.嚴(yán)禁將(jiāng)可(kě)能含有(yǒu)汙染物(wù)或(huò)病(bìng)原菌的(dí)實(shí)驗物品帶入細(xì)胞室(shì)。
3.細胞室內僅放置少量實驗必(bì)須耗材即(jí)可,不(bù)得(dé)整箱搬(bān)入(rù),出現潔淨(jìng)室(shì)內物品堆(duī)積(jī)狀況。
4.細(xì)胞室內(nèi)儲物(wù)櫃的(dí)物(wù)品放(fàng)置由相(xiāng)關管理人(rén)員(yuán)安(ān)排,並做標記。
第八條(tiáo) 細胞(bāo)室(shì)清潔(jié)守(shǒu)則(zé)
1.每(měi)周值日生(shēng)時(shí)間從周六(liù)開始(shǐ),至下(xià)周(zhōu)五(wǔ)結束。
2.日(rì)常維護:注(zhù)意培養(yǎng)箱顯示正常,顯(xiǎn)微鏡,冰(bīng)箱,超淨台的(dí)正(zhèng)常使用(yòng)與維護。細(xì)胞室(shì)內(nèi)以及門口(kǒu)生(shēng)物樣品(pǐn)垃圾桶的(dí)及(jí)時(shí)清(qīng)理。
3.每(měi)周大清(qīng)潔:每(měi)周五(wǔ)下午(wǔ)五點用新潔爾(ěr)滅打掃細(xì)胞(bāo)室。
清潔順序(xù):擦超淨台(用酒(jiǔ)精棉球(qiú));用新潔(jié)爾(ěr)滅(miè)擦(cā)桌麵,培養箱(xiāng),超(chāo)淨台(tái)以(yǐ)及冰(bīng)箱外壁,及桌(zhuō)上(shàng)的儀器(qì),細(xì)胞室牆(qiáng)麵(miàn),傳(chuán)遞窗(chuāng),風淋室(shì);給水浴(yù)鍋加(jiā)水或換水,細胞室(shì)衣櫃(guì)和(hé)拖鞋(xié)擺放(fàng)整齊,拖地(dì),紫外消(xiāo)毒細胞室30分鐘。
注:若(ruò)上周值日生(shēng)及時給培(péi)養箱內水(shuǐ)槽(cáo)加(jiā)足(zú)水,根(gēn)據(jù)經驗(yàn)未來(lái)一周內培養箱不會(huì)幹水(shuǐ),但值(zhí)日生仍(réng)應經常檢查,以(yǐ)便及時(shí)發現異(yì)常(cháng)情況(kuàng)。切記(jì)給(gěi)培養箱加滅(miè)菌(jūn)水。
4.在(zài)沒(méi)有出現(xiàn)問題的(dí)情(qíng)況下,每(měi)2個月(yuè)清潔一(yī)次培(péi)養(yǎng)箱:先將(jiāng)培養(yǎng)箱中(zhōng)的(dí)物(wù)品(pǐn)取出(chū)暫存(cún)於超淨台內(nèi),對(duì)於比(bǐ)較敏(mǐn)感(gǎn)的細(xì)胞可以(yǐ)暫存於(yú)另一(yī)個培養箱;將(jiāng)培養(yǎng)箱(xiāng)內(nèi)的(dí)不鏽(xiù)鋼板取出,包(bāo)括4塊(kuài)橫(héng)板和左右(yòu)2塊立(lì)著(zhuó)的架(jià)子,用酒精(jīng)棉球(qiú)清(qīng)潔鋼板(bǎn)和培養箱內壁;啟動(dòng)培養(yǎng)箱自消程(chéng)序。
第九(jiǔ)條(tiáo) 人員培(péi)訓
1.由將要(yào)做(zuò)細(xì)胞實驗(yàn)的人(rén)員(yuán)提出申請,填(tián)寫細胞室(shì)使(shǐ)用申(shēn)請(qǐng)表(biǎo)。
2.細胞(bāo)室負責(zé)老(lǎo)師視申(shēn)請(qǐng)人數酌(zhuó)情安排(pái)培訓(xùn)時間,培(péi)訓內(nèi)容包括安全(quán)培(péi)訓,理論(lùn)知識與實(shí)踐操作(zuò)培訓。
3.培訓考(kǎo)核(hé)合(hé)格後(hòu)由導師,培(péi)訓老(lǎo)師,細胞室負責人簽(qiān)字確(què)認(rèn)授予其細胞室使用權(quán)限。
4.培(péi)訓不(bù)合格者重新(xīn)參(cān)加培(péi)訓。
第十條 製度的(dí)實施與處罰(fá)
1.細(xì)胞(bāo)室負(fù)責(zé)人以(yǐ)及管(guǎn)理人員密切(qiē)關注細(xì)胞(bāo)室的(dí)使(shǐ)用(yòng)情況,發現違反(fǎn)規章操作者(zhě)首先(xiān)給予(yú)提醒(xǐng),但(dàn)須(xū)做記(jì)錄。
2.對於(yú)一周內違(wéi)反3次(cì)以內(nèi)者予(yú)以警(jǐng)告(gào),3-5次者給予停止(zhǐ)細(xì)胞室使(shǐ)用(yòng)權(quán)限2周(zhōu),超過5次者(zhě)停用其(qí)對細(xì)胞室使用(yòng)權限(xiàn),需重(zhòng)新參加培訓(xùn)後(hòu)才能再次使用(yòng)。
第三(sān)章 附則(zé)
本規(guī)章製(zhì)度(dù)從公(gōng)布之(zhī)日起(qǐ)開(kāi)始(shǐ)執行(háng),由(yóu)生(shēng)物醫學(xué)工程團隊(duì)實驗室(shì)管(guǎn)理(lǐ)委員會(huì)負責解釋及更正。本(běn)實(shí)驗(yàn)室(shì)追(zhuī)求不斷地進步(bù),各(gè)位(wèi)老(lǎo)師(shī)及使用人員(yuán)若有(yǒu)良好(hǎo)的建(jiàn)議可與(yǔ)細(xì)胞室負責人或實(shí)驗室(shì)管(guǎn)理(lǐ)委員(yuán)會成(chéng)員溝通,我們(mén)會(huì)及時協(xié)調(tiáo),旨(zhǐ)在為團隊提供(gōng)和諧(xié),的實(shí)驗(yàn)條件(jiàn)。