1，前言(yán)
藥(yào)品檢(jiǎn)驗實驗室通(tōng)常包含(hán)理(lǐ)化實驗(yàn)室(shì)和(hé)微(wēi)生物(wù)實驗室(shì)兩部分；理化(huà)實(shí)驗(yàn)室(shì)運(yùn)用物理，化學的方(fāng)法對生產用(yòng)的(dí)原(yuán)輔料，包裝(zhuāng)材料，中間(jiān)體及(jí)成品等進行(háng)鑒別(bié)，含量測定等分(fēn)析和檢驗，其結果(guǒ)作(zuò)為(wéi)檢品是否符合(hé)法(fǎ)定要(yào)求和企(qǐ)業內(nèi)部質量標準的依(yī)據。
微生物實(shí)驗室一般具(jù)有以下(xià)功(gōng)能：
①按(àn)《中(zhōng)國藥典(diǎn)》[1]要(yào)求(qiú)，進(jìn)行微(wēi)生(shēng)物檢(jiǎn)驗方(fāng)法的驗證，無菌檢查(chá)，微(wēi)生物限(xiàn)度(dù)檢(jiǎn)查(chá)，抗生素(sù)效(xiào)價(jià)的微生物(wù)檢(jiǎn)定，青(qīng)黴(méi)素酶(méi)及其活力測(cè)定(dìng)。
②按現(xiàn)行《藥(yào)品生(shēng)產質(zhì)量(liáng)管理(lǐ)規(guī)範》的要求，對醫(yī)藥工(gōng)業(yè)潔(jié)淨(jìng)室(shì)的潔(jié)淨(jìng)度進(jìn)行(háng)微生物測定(dìng)，對無菌生(shēng)產區(qū)環(huán)境日常(cháng)動(dòng)態監測以(yǐ)及生產(chǎn)過(guò)程(chéng)中(zhōng)其他(tā)需(xū)要進(jìn)行微生物檢(jiǎn)測(cè)的地(dì)方(fāng)，如(rú)對無菌過濾器的驗證，環境及設(shè)備(bèi)消(xiāo)毒效果(guǒ)的驗(yàn)證，滅菌(jūn)效(xiào)果(guǒ)的(dí)驗證(zhèng)，無(wú)菌藥(yào)品包裝(zhuāng)密封(fēng)性(xìng)驗(yàn)證中(zhōng)微(wēi)生(shēng)物挑戰(zhàn)性試(shì)驗等(děng)。
③細(xì)菌內(nèi)毒(dú)素檢查，注射劑(jì)的(dí)不溶性微(wēi)粒檢查，這類(lèi)檢(jiǎn)查雖不是(shì)檢(jiǎn)查微生(shēng)物，但它(tā)們對檢查環(huán)境(jìng)有較高的要(yào)求，通(tōng)常(cháng)設在微生(shēng)物實(shí)驗室。
2，微生物實驗室(shì)設計的(dí)有關要(yào)求(qiú)
《藥(yào)品(pǐn)生產質量(liáng)管理規(guī)範》[2]要(yào)求(qiú)藥(yào)品(pǐn)生(shēng)產(chǎn)企業(yè)應(yīng)負責(zé)藥(yào)品生產全(quán)過程(chéng)的(dí)質(zhì)量(liáng)管理和(hé)檢驗，並配備與(yǔ)藥(yào)品生產規模(mó)，品(pǐn)種，檢(jiǎn)驗要求相適應的(dí)人(rén)員，場所，儀器(qì)，設(shè)備(bèi)。在進(jìn)行(háng)微生(shēng)物(wù)實(shí)驗室的設計(jì)時(shí)，應(yīng)了解檢(jiǎn)驗(yàn)流(liú)程(chéng)，過程性(xìng)質(zhì)，有(yǒu)關標準(zhǔn)規範的規(guī)定(dìng)等(děng)，結(jié)合藥品生產(chǎn)企(qǐ)業(yè)生產品種(zhǒng)，檢驗(yàn)工(gōng)作量的大小(xiǎo)合(hé)理布置(zhì)相(xiāng)應的微生物檢(jiǎn)驗功能間(jiān)。
在藥(yào)品的微(wēi)生物(wù)學檢(jiǎn)驗(yàn)中，為(wéi)了(liǎo)保證檢(jiǎn)測(cè)結果的準確，可靠，針(zhēn)對微生(shēng)物(wù)學檢驗(yàn)產生(shēng)影(yǐng)響的幾種因素需要采(cǎi)取相(xiāng)應(yīng)的(dí)措施(shī)，通(tōng)常為以(yǐ)下(xià)幾種：
①藥(yào)品(pǐn)本(běn)身(shēn)的(dí)抑菌(jūn)性或藥品中(zhōng)防腐劑的(dí)抑菌性。它們會(huì)掩蓋無菌(jūn)藥品(pǐn)已受(shòu)汙染的事(shì)實或造(zào)成低(dī)於實(shí)際汙(wū)染(rǎn)水平(píng)的菌(jūn)檢結果(guǒ)。通常(cháng)采用(yòng)生長比(bǐ)較法，在(zài)實(shí)際檢驗(yàn)條件下，通過(guò)比較(jiào)對照(zhào)接(jiē)種(zhǒng)試(shì)驗菌(jūn)或(huò)陽(yáng)性(xìng)菌在有無供試品(pǐn)的(dí)狀(zhuàng)態下(xià)的(dí)生(shēng)長情況，來驗證供試品在(zài)該檢驗方(fāng)法下(xià)的抑(yì)菌性。
②標準菌種（試驗菌或(huò)陽性菌(jūn)）製備與傳(chuán)代，種(zhǒng)類及生(shēng)長狀態需(xū)符合(hé)現行(háng)《中國(guó)藥典》要求。
③培(péi)養(yǎng)基的(dí)促菌(jūn)生長(cháng)能力：培養(yǎng)基應(yīng)具備廣譜(pǔ)性(xìng)，有(yǒu)助於檢(jiǎn)品中所(suǒ)有(yǒu)存活(huó)微生物的生長(cháng)。通過接種不同(tóng)試驗菌並觀(guān)察它們(mén)的生長狀態，進行培養(yǎng)基(jī)靈敏度驗證試驗(yàn)。
④檢(jiǎn)驗(yàn)器具(jù)，如(rú)過濾係統的濾器，濾膜(mó)性質，材質(zhì)等(děng)性能(néng)，淋(lín)洗液(yè)，稀釋劑(jì)，培養基的(dí)無菌(jūn)性(xìng)及操(cāo)作(zuò)程序等(děng)，通常進(jìn)行陰性(xìng)對照(zhào)試(shì)驗(yàn)來(lái)檢(jiǎn)驗(yàn)其(qí)影(yǐng)響。
⑤培(péi)養條件(jiàn)（溫(wēn)度，濕(shī)度及需氧(yǎng)或厭氧(yǎng)）及檢測環(huán)境應符(fú)合相關(guān)要求。
2.1無(wú)菌(jūn)檢查(chá)實驗室(shì)
2.1.1用途(tú)
用(yòng)於(yú)檢(jiǎn)查藥典要求無(wú)菌的(dí)藥品(pǐn)，醫療器具，原(yuán)料，輔料(liào)及其(qí)他品種是否無(wú)菌。
2.1.2《中國(guó)藥(yào)典(diǎn)》對無菌(jūn)檢(jiǎn)查(chá)實驗室(shì)要(yào)求(qiú)
無菌檢(jiǎn)查(chá)應在環境(jìng)潔淨度10 000級下的局部(bù)潔(jié)淨(jìng)度(dù)100級(jí)的單向流空(kōng)氣(qì)區域(yù)內或隔離(lí)係(xì)統中進行，其全(quán)過(guò)程(chéng)必(bì)須(xū)嚴格遵(zūn)守(shǒu)無菌操作(zuò)，防止(zhǐ)微(wēi)生物汙(wū)染。單(dān)向流空氣區(qū)，工(gōng)作台麵及環境應定期按《醫藥(yào)工業(yè)潔淨室(shì)（區）懸(xuán)浮粒子，浮遊菌和沉降(jiàng)菌(jūn)的測試(shì)方法(fǎ)》的(dí)現行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔(jié)淨度(dù)驗(yàn)證。隔離係統(tǒng)按(àn)相關(guān)的要(yào)求(qiú)進行驗證(zhèng)，其(qí)內部(bù)環(huán)境(jìng)的潔淨度須符合(hé)無(wú)菌(jūn)檢(jiǎn)查(chá)的要求。
2.2微(wēi)生(shēng)物限度(dù)檢(jiǎn)查實驗室(shì)
2.2.1用途(tú)
用於檢查非(fēi)規定滅菌製(zhì)劑及其原(yuán)料(liào)，輔料受(shòu)微生(shēng)物汙染(rǎn)的程度。檢(jiǎn)查(chá)項目包括(kuò)細菌數，黴(méi)菌數，酵(jiào)母菌(jūn)數及控製菌檢查。
2.2.2《中國藥典》
對(duì)微生物限度(dù)檢(jiǎn)查(chá)實(shí)驗室的要(yào)求
微生物限(xiàn)度檢(jiǎn)查應(yīng)在環(huán)境(jìng)潔(jié)淨度(dù)10 000級下(xià)的(dí)局部潔淨度100級的(dí)單向流空(kōng)氣區域(yù)內進行。檢(jiǎn)驗全(quán)過(guò)程必須嚴格遵(zūn)守無菌(jūn)操作(zuò)，防(fáng)止再(zài)汙染。單(dān)向流空(kōng)氣區域，工作(zuò)台麵(miàn)及環(huán)境(jìng)應(yīng)定期按(àn)《醫(yī)藥工業(yè)潔(jié)淨(jìng)室(shì)（區(qū)）懸浮(fú)粒子，浮遊(yóu)菌和沉降菌的(dí)測試(shì)方(fāng)法》的(dí)現行(háng)國家標(biāo)準進行(háng)潔(jié)淨度(dù)驗(yàn)證(zhèng)。
2.3抗(kàng)生素效(xiào)價(jià)的微生(shēng)物(wù)檢定(dìng)室(shì)
2.3.1用途
在(zài)適宜(yí)條件(jiàn)下，根據(jù)量(liáng)反(fǎn)應(yīng)平(píng)行綫(xiàn)原理(lǐ)設計(jì)，通過檢(jiǎn)測抗生(shēng)素(sù)對微生物(wù)的(dí)抑製作用(yòng)，計算抗生素活性（效價）。
2.3.2《中國藥典(diǎn)》[1]對(duì)抗生素(sù)效價(jià)的微(wēi)生物檢定(dìng)室的(dí)環境(jìng)潔淨(jìng)度(dù)未有(yǒu)明確規(guī)定(dìng)要求(qiú)
在國家(jiā)食品(pǐn)藥品監(jiān)督管(guǎn)理(lǐ)局2000年(nián)9月(yuè)頒發的(dí)《藥品檢(jiǎn)驗所(suǒ)實驗(yàn)室(shì)質(zhì)量管(guǎn)理(lǐ)規範(fàn)（試(shì)行）》中(zhōng)第十(shí)八條中(zhōng)規定有“抗生素微生物檢(jiǎn)定(dìng)實驗(yàn)室分(fēn)為半(bàn)無菌操(cāo)作間和緩(huǎn)衝(chōng)間。半(bàn)無(wú)菌(jūn)操(cāo)作(zuò)間設有紫外(wài)綫燈(dēng)，操(cāo)作(zuò)台(tái)宜(yí)穩固(gù)，並保(bǎo)持(chí)水平(píng)。實(shí)驗室內(nèi)應(yīng)光綫明亮，並有(yǒu)控(kòng)製溫(wēn)度，濕度的設備”。通(tōng)常按(àn)潔(jié)淨(jìng)度100 000級設計。
抗生素(sù)效價(jià)的微生物檢定(dìng)實驗所用燒杯，漏鬥，移(yí)液管(guǎn)，容量(liáng)瓶，滴(dī)管(guǎn)，小鋼管(guǎn)等(děng)器皿應(yīng)與(yǔ)其他器(qì)皿(mǐn)分(fēn)開洗滌(dí)，檢(jiǎn)定(dìng)用(yòng)平板(bǎn)與(yǔ)其(qí)他培養(yǎng)基(jī)平(píng)板也應分開洗滌(dí)，防止抗(kàng)生素對其他微生(shēng)物培養的(dí)汙染(rǎn)。
2.4細菌(jūn)內(nèi)毒(dú)素檢查用室
2.4.1用(yòng)途
利用(yòng)鱟試劑(jì)來檢測(cè)或(huò)量(liáng)化由革蘭陰性菌(jūn)產生的細菌(jūn)內(nèi)毒素(sù)，以判(pàn)斷供(gōng)試品(pǐn)中(zhōng)細(xì)菌內毒素的(dí)*是否符(fú)合(hé)規定。適用於(yú)某(mǒu)些(xiē)不能用家兔(tù)進行(háng)熱(rè)原檢測(cè)的品種，如(rú)放(fàng)射性(xìng)藥(yào)劑(jì)腫瘤(liú)抑製劑等(děng)，因(yīn)為這(zhè)些製劑(jì)具有細(xì)胞毒性(xìng)而(ér)有一定的生物效(xiào)應。目前(qián)一(yī)般(bān)認為特別適(shì)用(yòng)於生產過(guò)程中的熱(rè)原控製，因(yīn)為(wéi)該檢(jiǎn)查法操作簡單，實驗(yàn)費用少，結(jié)果迅速可(kě)得。但該(gāi)檢(jiǎn)查(chá)法(fǎ)對(duì)革(gé)蘭陰(yīn)性(xìng)菌以外的內毒(dú)素不(bù)夠敏感(gǎn)，故尚不能(néng)代替(tì)家(jiā)兔(tù)熱(rè)原(yuán)法。
2.4.2《中(zhōng)國(guó)藥(yào)典(diǎn)》中(zhōng)要求
進(jìn)行細(xì)菌(jūn)內(nèi)毒(dú)素(sù)含(hán)量測(cè)定試(shì)驗所用(yòng)的(dí)器皿需經處理(lǐ)，以去(qù)除(chú)可能(néng)存在(zài)的外(wài)源(yuán)性(xìng)內毒素，試驗操作過程應防(fáng)止(zhǐ)微(wēi)生物(wù)的汙(wū)染，在清(qīng)淨環境中進行，在層(céng)流工(gōng)作台(tái)內(nèi)操(cāo)作。實驗前，須用肥皂洗手(shǒu)，用75%乙(yǐ)醇(chún)（用叔丁(dīng)醇代替乙醇）棉球消毒(dú)。但(dàn)《中國(guó)藥典》中未對細(xì)菌(jūn)內毒素檢(jiǎn)查(chá)用室(shì)的環(huán)境潔淨度(dù)明確規定要(yào)求。一般(bān)來說細(xì)菌內(nèi)毒(dú)素(sù)檢查用(yòng)室為半(bàn)無(wú)菌(jūn)操作間(jiān)：室(shì)內設(shè)滅菌(jūn)紫外(wài)燈，潔淨度要(yào)求一般為100000級。也有(yǒu)一些(xiē)藥廠為了節省能耗(hào)而(ér)將(jiāng)其設(shè)置(zhì)為一(yī)般環(huán)境(jìng)。
2.5不溶(róng)性微粒檢查用室
2.5.1用(yòng)途(tú)
在(zài)可見(jiàn)異物檢查(chá)符(fú)合規(guī)定(dìng)後(hòu)，用(yòng)以(yǐ)檢(jiǎn)查溶(róng)液型(xíng)靜脈(mài)用注射(shè)劑中(zhōng)不溶性微粒(lì)的大小(xiǎo)和(hé)數量。
2.5.2《中國藥典》[1]要(yào)求(qiú)
試驗操作(zuò)環(huán)境應(yīng)不得引入微粒，測(cè)定(dìng)前的(dí)操(cāo)作應在(zài)層流淨化(huà)台(tái)下進行(háng)。玻璃儀(yí)器和其(qí)他(tā)所需的(dí)用品應潔(jié)淨(jìng)無(wú)微(wēi)粒(lì)，本法所(suǒ)用微(wēi)粒檢查(chá)用水(shuǐ)（或溶(róng)劑）使(shǐ)用前須經(jīng)不大於1.0 um的微孔濾膜濾過。
2.5.3因《中(zhōng)國藥典》要(yào)求(qiú)注射(shè)用(yòng)水須(xū)進(jìn)行細菌內毒素檢測(cè)，因此(cǐ)溶液(yè)型靜脈(mài)用(yòng)注(zhù)射劑(jì)的不溶(róng)性(xìng)微粒檢(jiǎn)查(chá)可與細(xì)菌(jūn)內毒(dú)素檢查(chá)用室(shì)設成一間(jiān)，不用(yòng)專(zhuān)設(shè)一室，配(pèi)置相應(yīng)的層流淨化台。
3，相關問題及案例(lì)
3.1陽性接(jiē)種(zhǒng)室
（1）微生物(wù)檢驗(yàn)離不開對標準菌(jūn)種及(jí)所檢測(cè)的菌種(zhǒng)進行(háng)各種處理，如(rú)培(péi)養基的(dí)靈(líng)敏度檢(jiǎn)查，無菌(jūn)檢查及(jí)微生(shēng)物限(xiàn)度(dù)檢查(chá)方(fāng)法(fǎ)的驗證(zhèng)，陽性對照，抗生(shēng)素效價的(dí)微生物檢定時菌種(zhǒng)及(jí)菌(jūn)懸(xuán)液(yè)製(zhì)備，轉接(jiē)種等，這(zhè)些(xiē)活動要(yào)直(zhí)接(jiē)處理微生物菌(jūn)種，在一定條(tiáo)件下，許(xǔ)多(duō)種(zhǒng)類都是病原菌(jūn)，因此(cǐ)有關(guān)微生物暴露性(xìng)操(cāo)作活動(dòng)盡可(kě)能(néng)在(zài)生物安全(quán)櫃內進行。所(suǒ)有(yǒu)染(rǎn)菌物(wù)品，培(péi)養(yǎng)物均應經(jīng)高壓滅菌處(chǔ)理(lǐ)後再清洗(xǐ)。
（2）無菌檢查及微(wēi)生物限(xiàn)度(dù)檢查中(zhōng)陽(yáng)性(xìng)對(duì)照(zhào)菌液(yè)加入含供(gōng)試(shì)品(pǐn)的培(péi)養基的(dí)操作，不(bù)能(néng)在(zài)檢(jiǎn)測供(gōng)試(shì)品的(dí)無(wú)菌室或淨化(huà)台上進行，以免(miǎn)汙染(rǎn)供試品及操(cāo)作環境。可設置一間陽性接種(zhǒng)室進行上述操作。以前有的將其設(shè)置為一(yī)般(bān)環境；有的根本(běn)就(jiù)未(wèi)專(zhuān)設此室。《中(zhōng)國(guó)藥典》（2005年(nián)版）頒發後(hòu)，目前許(xǔ)多人認為將其設置為(wéi)潔(jié)淨度(dù)10 000級，設置(zhì)單獨(dú)的人(rén)淨，物淨(jìng)係(xì)統。
3.2無菌室
《中(zhōng)國藥典》要求無菌藥品(pǐn)的(dí)無菌(jūn)性(xìng)檢(jiǎn)查(chá)室，非(fēi)無(wú)菌(jūn)藥品的微(wēi)生物限(xiàn)度檢查室的環境潔(jié)淨度(dù)都為10 000級（局部(bù)潔淨度(dù)100級(jí)），通(tōng)常都(dū)稱為無菌室；若某(mǒu)藥(yào)廠既生(shēng)產(chǎn)無菌藥品(pǐn)，也生產非無(wú)菌藥品，為(wéi)防(fáng)止非無菌藥品(pǐn)供試品對(duì)無菌藥品(pǐn)的(dí)無菌性(xìng)檢查(chá)的汙(wū)染(rǎn)，有兩種(zhǒng)方(fāng)式(shì)：
①如果同時進(jìn)行這(zhè)兩類藥品(pǐn)的檢驗(yàn)，將(jiāng)這(zhè)兩種無(wú)菌室分開設(shè)置二套(tào)，使(shǐ)用(yòng)各(gè)自(zì)的人淨，物淨係統。此種方(fāng)式無(wú)菌(jūn)室利(lì)用率(shuài)不高。
②通常(cháng)隻設一(yī)套無(wú)菌室，分(fēn)期進行這兩類藥(yào)品的(dí)檢驗，合(hé)理(lǐ)安排檢(jiǎn)驗規程，嚴格操作(zuò)並(bìng)經驗證，確(què)保(bǎo)不對(duì)無(wú)菌(jūn)藥品的無菌性檢(jiǎn)查產(chǎn)生汙(wū)染(rǎn)。
3.3隔離係統(tǒng)
《中(zhōng)國藥(yào)典》[1]無菌檢(jiǎn)查(chá)法中被為可(kě)使(shǐ)用(yòng)的設施(shī)，它(tā)能(néng)提供並(bìng)保持與外(wài)界環境隔離(lí)的百(bǎi)級潔淨(jìng)度的操作環(huán)境(jìng)。隔(gé)離操作器所處環境的級(jí)別取決(jué)於(yú)它(tā)們(mén)的設計(jì)及其應用(yòng)。美國藥典並不(bù)要求(qiú)它(tā)安裝(zhuāng)在潔(jié)淨區/室(shì)，但應控製無關(guān)人(rén)員(yuán)進(jìn)入其所處房(fáng)間(jiān)；歐盟(méng)GMP則(zé)建(jiàn)議應(yīng)將它放置於(yú)100 000級的(dí)環(huán)境中(zhōng)。采用(yòng)隔(gé)離操作(zuò)技術(shù)能(néng)zui大限度(dù)降低(dī)操(cāo)作(zuò)人員和外界(jiè)環境(jìng)對(duì)潔淨空(kōng)間的影(yǐng)響(xiǎng)。它(tā)既(jì)可(kě)用(yòng)於(yú)無菌(jūn)實(shí)驗，又(yòu)可用於(yú)其他需(xū)要高(gāo)潔(jié)淨度的(dí)多(duō)種研究和實驗。但隔離操(cāo)作(zuò)器(qì)的(dí)性(xìng)能與操作程序的驗證尤為(wéi)重要，隔離(lí)用(yòng)袖管(guǎn)/手套係(xì)統應(yīng)進行常(cháng)規監測(cè)，這包括經常進行必要(yào)的檢漏(lòu)試(shì)驗。隔離係統的諸多優勢如(rú)潔淨(jìng)區域的隔(gé)離(lí)化，自動化(huà)，小(xiǎo)型化(huà)等(děng)將使其成為無菌區(qū)的(dí)發展未來。
3.4培養室
用來放(fàng)置(zhì)培(péi)養(yǎng)各類微(wēi)生物(wù)生長(cháng)的細(xì)菌培養箱和(hé)真(zhēn)菌培養(yǎng)箱(xiāng)。大多(duō)數將(jiāng)其設(shè)置為(wéi)一般環境；也(yě)有的(dí)將其潔淨(jìng)度(dù)設置為(wéi)100 000級。設(shè)計時根據(jù)藥(yào)廠相關部門的要求(qiú)進行。