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無菌(jūn)室也(yě)稱接種室(shì),是係統接種,純(chún)化(huà)菌種等無菌(jūn)操作的實驗(yàn)室(shì)。在微生物(wù)工(gōng)作中(zhōng),菌(jūn)種的接種(zhǒng)移(yí)植(zhí)是(shì)一(yī)項主要(yào)操作,這(zhè)項操(cāo)作的(dí)特點就(jiù)是要保證(zhèng)菌(jūn)種純種,防(fáng)止雜(zá)菌(jūn)的汙染(rǎn)。在一般(bān)環(huán)境的(dí)空(kōng)氣中,由(yóu)於(yú)存在許多塵埃(āi)和雜(zá)菌,很(hěn)易(yì)造成(chéng)汙染,對接(jiē)種工作幹擾(rǎo)很(hěn)大(dà)。
無菌(jūn)室的(dí)設置應根據既(jì)經濟(jì)又科學的(dí)原則(zé)來設置。其(qí)基本(běn)要求(qiú)有以(yǐ)下(xià)幾點(diǎn):
(1)無菌室應有內,外兩間,內(nèi)間是無(wú)菌(jūn)室,外(wài)間是緩衝(chōng)室。房間容積不宜過(guò)大(dà),以(yǐ)便於空(kōng)氣滅菌。內(nèi)間(jiān)麵(miàn)積2×2.5=5m2,外(wài)間麵(miàn)積1×2=2m2,高(gāo)以(yǐ)2.5m以下為(wéi)宜(yí),都應有天花板。
(2)內間(jiān)應當設拉(lā)門(mén),以減(jiǎn)少空(kōng)氣的(dí)波動(dòng),門應(yīng)設在(zài)離(lí)工(gōng)作台zui遠的(dí)位(wèi)置(zhì)上(shàng);外間(jiān)的門也(yě)用拉(lā)門,要(yào)設(shè)在(zài)距內(nèi)間(jiān)zui遠的位置(zhì)上(shàng)。
(3)在(zài)分(fēn)隔內間與(yǔ)外間(jiān)的牆壁或“隔(gé)扇(shàn)”上,應開(kāi)一個小(xiǎo)窗,作接種(zhǒng)過程中(zhōng)必(bì)要(yào)的內(nèi)外傳遞物(wù)品的通道(dào),以(yǐ)減少人員(yuán)進出(chū)內間的(dí)次(cì)數(shù),降低汙染(rǎn)程(chéng)度(dù)。小窗(chuāng)寬60cm,高40cm,厚30cm,內外(wài)都掛(guà)對拉(lā)的窗(chuāng)扇。
(4)無菌室容積小而(ér)嚴密,使(shǐ)用一(yī)段時間(jiān)後(hòu),室內溫(wēn)度很高,故(gù)應設(shè)置通氣窗。通氣窗(chuāng)應設在內室(shì)進門處的頂棚上(shàng)(即(jí)離(lí)工作台zui遠的位(wèi)置(zhì)),為雙(shuāng)層結(jié)構(gòu),外層(céng)為百葉窗(chuāng),內(nèi)層可用(yòng)抽板(bǎn)式窗扇(shàn)。通氣(qì)窗可(kě)在內(nèi)室使(shǐ)用(yòng)後(hòu),滅(miè)菌前開(kāi)啟,以流(liú)通(tōng)空氣。有(yǒu)條件可安(ān)裝恒(héng)溫恒濕(shī)機。
無菌(jūn)室(shì)內(nèi)設備和用(yòng)具:
(1)無菌室(shì)內的工作台,不論(lùn)是(shì)什(shí)麼(mó)材(cái)質,用途的,都要求表(biǎo)麵光滑(huá)和台(tái)麵水平。
(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個紫(zǐ)外燈(多為30W)。內(nèi)室的(dí)紫(zǐ)外(wài)綫燈(dēng)應(yīng)安裝(zhuāng)在(zài)經常(cháng)工作(zuò)的(dí)座位正上(shàng)方,離地麵2m,外室(shì)的紫外綫燈(dēng)可安裝在外(wài)室中(zhōng)央(yāng)。
(3)外室應有的(dí)工作服,鞋(xié),帽,口罩,盛(shèng)有來蘇(sū)兒水(shuǐ)的瓷盆和毛巾,手(shǒu)持(chí)噴(pēn)霧器(qì)和5%石炭(tàn)酸(suān)溶(róng)液(yè)等。
(4)內(nèi)室(shì)應(yīng)有酒(jiǔ)精(jīng)燈,常用(yòng)接(jiē)種(zhǒng)工具,不鏽(xiù)鋼製(zhì)的刀,剪,鑷(niè)子(zǐ),70%的酒(jiǔ)精棉球,工業酒精,載玻璃(lí)片,特種(zhǒng)蠟筆,記(jì)錄本,鉛(qiān)筆,標簽(qiān)紙(zhǐ),膠水,廢物(wù)筐等。
無菌室的滅菌(jūn)消毒:
(1)薰蒸:這是無菌(jūn)室(shì)*滅(miè)菌(jūn)的(dí)措施(shī)。無菌(jūn)室使(shǐ)用(yòng)了(liǎo)較(jiào)長時間(jiān),汙染(rǎn)比較嚴(yán)重(zhòng)時,應進(jìn)行薰蒸(zhēng)滅(miè)菌(jūn)。可(kě)用甲(jiǎ)醛,乳(rǔ)酸或硫磺(huáng)薰蒸(zhēng)。
(2)噴(pēn)霧(wù):在(zài)每次(cì)使用無(wú)菌室前進行(háng)。噴霧可(kě)促(cù)使(shǐ)空(kōng)氣中(zhōng)微(wēi)粒及(jí)微(wēi)生(shēng)物(wù)沉降(jiàng),防止桌(zhuō)麵,地(dì)麵(miàn)上(shàng)的微(wēi)塵(chén)飛(fēi)場(cháng),並(bìng)有殺(shā)菌(jūn)作(zuò)用。可用5%石(shí)炭酸噴霧(wù)。
(3)紫(zǐ)外(wài)綫照(zhào)射:在(zài)每(měi)次使(shǐ)用(yòng)無(wú)菌室(shì)前進(jìn)行。紫(zǐ)外(wài)綫有(yǒu)較(jiào)好(hǎo)的殺菌(jūn)效(xiào)果。通(tōng)常(cháng)應開(kāi)啟紫(zǐ)外綫(xiàn)燈照射(shè)30~60min。
無菌(jūn)室工作(zuò)規程:
(1)無(wú)菌(jūn)室(shì)滅菌(jūn)。每次使用前(qián)開啟紫外綫(xiàn)燈照射(shè)30min以(yǐ)上,或(huò)在使用(yòng)前30min,對內外室(shì)用5%石(shí)炭(tàn)酸噴霧。
(2)用肥(féi)皂洗(xǐ)手(shǒu)後(hòu),把所需器材搬(bān)入外室(shì);在(zài)外室換上已滅(miè)菌的工作服(fú),工作(zuò)帽和(hé)工作鞋,戴(dài)好口罩,然(rán)後(hòu)用(yòng)2%煤酚(fēn)皂液將(jiāng)手浸洗2分鐘。
(3)將(jiāng)各種需用物(wù)品搬(bān)進內室(shì)清點(diǎn),就(jiù)位,用5%石炭酸在(zài)工(gōng)作(zuò)台麵上方和(hé)操作(zuò)員(yuán)站(zhàn)位空(kōng)間(jiān)噴(pēn)霧,返回外室,5~10min後再進內室(shì)工作(zuò)。
(4)接種(zhǒng)操(cāo)作前(qián),用(yòng)70%酒精(jīng)棉球擦(cā)手;進(jìn)行無(wú)菌操(cāo)作時,動(dòng)作要輕緩(huǎn),盡量(liáng)減(jiǎn)少空氣波(bō)動(dòng)和(hé)地麵揚塵。
(5)工(gōng)作中(zhōng)應注(zhù)意安全(quán)。如(rú)遇(yù)棉塞(sāi)著火,用(yòng)手(shǒu)緊握或用濕布(bù)包裹(guǒ)熄(xī)滅,切(qiē)勿(wù)用嘴吹,以(yǐ)免(miǎn)擴大燃(rán)燒;如(rú)遇有(yǒu)菌培養物灑落(là)或(huò)打碎有菌(jūn)容(róng)器時,應用浸潤5%石(shí)炭(tàn)酸的(dí)抹布(bù)包裹(guǒ)後,並用(yòng)浸(jìn)潤5%石炭(tàn)酸(suān)的抹(mǒ)布(bù)擦拭台麵或(huò)地麵,用(yòng)酒精(jīng)棉(mián)球擦手後再(zài)繼續操作(zuò)。
(6)工作(zuò)結(jié)束(shù),立(lì)即(jí)將台(tái)麵(miàn)收(shōu)拾幹(gān)淨(jìng),將(jiāng)不應在無(wú)菌室(shì)存(cún)放的物(wù)品和(hé)廢棄物全部(bù)拿出(chū)無菌(jūn)室後,對(duì)無(wú)菌室用5%石(shí)炭(tàn)酸噴(pēn)霧,或開紫外(wài)綫燈(dēng)照射30min。